соли ЭДТА (буфером).
■ Неорганические фосфаты в ротовой жидкости определяют микрометодом Chen, Toribara, Warner (1956) в модификации (Персиц М. М., Колесник А. Г., 1976). 2,5% водный раствор молибденово-кислого аммония смешивают с 1Н-раствором серной кислоты и 10% раствором аскорбиновой кислоты в соотношении 1:8:1. Реакционную массу тщательно перемешивают. К 10 мкл пробы фильтрата или центрифугата ротовой жидкости добавляют 3,0 мл смеси реактивов. Одновременно с пробой готовят серию стандартных растворов, содержащих 1 -5 мкг фосфора. Все пробы и стандарты инкубируют в термостате при 37°С в течение 1,5 часов. Окрашенные растворы фотометрируют при длине волны 820 нм. Концентрацию фосфора в пробе рассчитывают по калибровочной кривой.
■ Фтор в ротовой жидкости определяют электрохимическим методом фтор-селективным электродом. Предварительно пробы ротовой жидкости так же, как стандартные растворы фтористого натрия (для калибровки электрода), разводят в соотношении 1:1с ацетатным буфером (рН 4,7) или другим буфером, регулирующим общую ионную силу (TISAB).
Концентрацию фтора в пробах ротовой жидкости определяют по калибровочному графику, построенному на полулогарифмической бумаге или вычисляют по формуле:
Сp = (Cсm•∆E) / S
где:
Сст – концентрация фтора в стандартном растворе в районе пробы;
∆Е – разница между потенциалом стандартного раствора и потенциалом в растворе пробы;
S – крутизна характеристики электрода (электродная функция фторидного электрода), равная 55—58 мВ при 10-кратном изменении концентрации фторид-иона.
■ Определение включения фтора в эмаль из зубной пасты проводится на удаленных зубах, а также в клинике (in vitro или in vivo).
Пробу эмали получают кислотной биопсией по методу Hotz, Muhlemann, Schait (1970) в модификации М. М. Персица (1974). Эта методика позволяет получить данные о послойном приросте концентрации фтора в поверхности эмали на глубине 5—12 мкм. Биопсию эмали проводят путем наложения на созданное тем или другим способом «окно» на поверхности эмали диска из фильтровальной бумаги, смоченной 5,0 мкл 0,5 М хлорной кислоты, на 20—30 секунд. Затем диск переносят в полиэтиленовую пробирку, которую предварительно наполняют 1,0 мл буфера TISAB (рН 5,25) и 1,0 мл раствора фтористого натрия (концентрация фториона – 0,1 мг/л). Фтор в пробах деминерализата эмали определяется электрохимическим способом фтор-селективным электродом. Предварительно фтор-селективный электрод калибруется стандартными растворами фтора – 0,1 мг/л; 1,0 мг/л; 10,0 мг/л.
■ Кальций в растворе биоптата эмали определяется на атомно-абсорбционном спектрофотометре с добавление в пробу 0,1% буферного раствора трилона «Б» (двунатриевой соли ЭДТА).
■ Фосфор в пробах биоптата эмали определяется микрометодом Chen, Toribara, Werner (1956). Методика подробно изложена выше.
Толщину деминерализованного слоя эмали рассчитывают по формуле:
h = (m / d) • S
где:
h – толщина